目的 构建p53正向凋亡调节因子重组腺病毒(Ad-PUMA)载体,探讨Ad-PUMA对人体内外胰腺癌的治疗作用.方法 利用Ad-Easy系统在大肠杆菌同源重组,构建Ad-PUMA腺病毒载体,在293细胞内成功包装并鉴定后,以Ad-PUMA转染人转移胰腺癌细胞株AsPC-1.用MTT法检测转染前后存活细胞,观察Ad-PUMA的体外抑瘤作用;用Western blot方法鉴定转染前后AsPC-1细胞内PUMA蛋白表达.通过裸鼠皮下胰腺癌移植瘤模型观察Ad-PUMA的体内抑瘤效果;Westem blot方法鉴定Ad-PUMA转染后肿瘤组织内PUMA蛋白表达,TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase biotin-dUTP nick end labeling)法检测肿瘤组织细胞凋亡.结果 在体外,随着Ad-PUMA感染剂量增加,细胞内PUMA蛋白表达逐渐增加,细胞存活率逐渐下降;在体内,Ad-PUMA可显著抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,其抑瘤率为44.2
作者：张克君；李德春；崔海宁
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2009 年 29卷 1期
