目的 通过表型实验分析Hfq蛋白对霍乱弧菌环境适应能力的影响,并通过分子实验验证Hfq对环境生存及致病相关基因转录的调控.方法 基于自杀质粒缺失霍乱弧菌的hfg基因,并构建相应回补株；通过表型实验,比较霍乱弧菌野生株和hfg突变株在细菌运动能力、生物膜形成、外膜抗性和氧化应激能力上的差异；应用逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)技术对Hfq可能调控的相关基因的转录水平进行比较.结果 成功构建霍乱弧菌hfg缺失株及回补株,表型实验表明hfq突变株的菌株游动性降低,生物膜形成能力增强,对十二烷基磺酸钠(SDS)和庆大霉素的耐受性显著下降,并且与野生株相比,hfg突变株对H2O2刺激更为敏感.RT-qPCR实验证明Hfq对霍乱弧菌鞭毛合成、胞外多糖合成、外膜蛋白以及氧化应激相关基因的转录有调控作用.结论 Hfq蛋白作为RNA伴侣分子,能够通过调控一些生存及致病相关基因的转录进而影响霍乱弧菌的生物膜形成、氧化应激反应、抗生素抗性等能力,表明Hfq可能与其他调控子一起,在霍乱弧菌的生存、代谢以及致病因子转录的协调控制上起关键作用.
作者：陈秀琴；李杰；王瑞白；闫梅英；阚飙；高鹤；闫志勇
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2013 年 33卷 4期
