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目的:探讨Krüppel样因子2(KLF2)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipo-protein, ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)微小RNA 146a(microRNA-146a, miR-146a)及细胞因子单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法构建 KLF2过表达腺病毒载体( rAAV-KLF2)及KLF2-siRNA,分别转染HUVECs及ox-LDL诱导的HUVECs。于0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h收集HUVECs,采用实时荧光定量PCR,检测HUVECs miR-146a的表达;设计合成锁核酸(the locked nucleic acid,LNA))修饰的anti-miR-146a的反义核苷酸(LNA-anti-miR-146a)转染HUVECs。收集各组细胞上清,采用双抗体夹心ABC-ELISA方法检测MCP-1及IL-6的表达。结果KLF2明显抑制静息及ox-LDL诱导的HUVECs miR-146a的表达,并显著减少ox-LDL诱导HUVECs MCP-1、IL-6的表达,且具有时间依赖性;miR-146 a 沉默可削弱ox-LDL诱导的内皮细胞炎症反应,而且部分逆转了KLF2对内皮细胞炎症反应的抑制作用。结论 KLF2通过下调miR-146 a的表达抑制ox-LDL活化的HUVECs MCP-1、IL-6的分泌。

作者:王祥;黎明;杨丽元

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2014 年 5期

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作者:
王祥;黎明;杨丽元
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2014 年 5期
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Krüppel样因子2 人脐静脉内皮细胞系 氧化型低密度脂蛋白 microRNA-146 a Krüppel-like factor 2 Human umbilical vein endothelial cells Oxidized low density lipoprotein microRNA-146 a
目的:探讨Krüppel样因子2(KLF2)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipo-protein, ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)微小RNA 146a(microRNA-146a, miR-146a)及细胞因子单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法构建 KLF2过表达腺病毒载体( rAAV-KLF2)及KLF2-siRNA,分别转染HUVECs及ox-LDL诱导的HUVECs。于0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h收集HUVECs,采用实时荧光定量PCR,检测HUVECs miR-146a的表达;设计合成锁核酸(the locked nucleic acid,LNA))修饰的anti-miR-146a的反义核苷酸(LNA-anti-miR-146a)转染HUVECs。收集各组细胞上清,采用双抗体夹心ABC-ELISA方法检测MCP-1及IL-6的表达。结果KLF2明显抑制静息及ox-LDL诱导的HUVECs miR-146a的表达,并显著减少ox-LDL诱导HUVECs MCP-1、IL-6的表达,且具有时间依赖性;miR-146 a 沉默可削弱ox-LDL诱导的内皮细胞炎症反应,而且部分逆转了KLF2对内皮细胞炎症反应的抑制作用。结论 KLF2通过下调miR-146 a的表达抑制ox-LDL活化的HUVECs MCP-1、IL-6的分泌。