目的:通过检测羧甲基茯苓多糖( carboxymethytl pachymaram ,CMP)处理后人外周血源性树突状细胞(dendritic cells,DC)中细胞因子信号转导抑制分子-1(SOCS-1)基因甲基化水平及表达情况,探讨 CMP 对 DC 体外成熟的影响。方法通过重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和IL-4体外诱导人外周血源性单核细胞源DC,并促进成熟,分别加入不同浓度的CMP (终浓度为10、50、100 mg/L),应用甲基化特异性PCR( methylation specific PCR ,MSP)和real-time PCR法分别分析SOCS-1基因甲基化水平及表达情况;应用流式细胞术、混合淋巴细胞反应( MLR)和ELISA分别检测DC的表面标志、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-12分泌的变化。结果经CMP刺激后DC中SOCS-1基因甲基化水平明显增高,SOCS-1基因表达水平显著降低,表面标志( CD80、CD83、CD86、HLA-DR)、刺激淋巴细胞增殖能力及IL-12的分泌水平均上调,且呈剂量依赖趋势。50 mg/L和100 mg/L CMP刺激组SOCS-1基因甲基化水平、IL-12分泌量及刺激淋巴细胞增殖指数均显著高于对照组,SOCS-1基因表达水平显著低于对照组。100 mg/L CMP刺激组CD80、CD83和HLA-DR表达水平显著高于对照组。结论 CMP能促进人外周血源性DC中SOCS-1基因甲基化,减少SOCS-1基因表
作者:钱高潮;潘薇;田晓静;丁志祥;金文涛;张琪
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2014 年 8期