目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对乙型肝炎病毒( HBV)的特定基因进行编辑,评价其抑制HBV复制的效应。方法针对HBV的S 基因设计2套CRISPR/Cas9表达质粒并转染HepG2-N10细胞株。采用噻唑蓝( MTT)法测定细胞毒性、化学发光法检测HBsAg、荧光定量RT-PCR( qRT-PCR)法检测病毒mRNA表达水平,荧光定量PCR( qRT-PCR)法检测HBV DNA含量,高通量测序分析HBV基因组编辑情况。结果未见明显细胞毒性效应;2套针对HBV的CRISPR/Cas9表达质粒组培养基中HBsAg含量较对照组降低了24.2
作者:吴涛;朱小娟;崔仑标;樊欢;陈银;郭喜玲;赵康辰;史智扬;朱凤才
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2015 年 8期