目的：构建大鼠乳清酸蛋白(WAP)启动子调控下的人防御素3(HNP-3)的重组减毒猪霍乱沙门菌C78-1△crp(pEGFP-WAP-HNP-3),并对其生物学特性进行研究。方法将质粒pEGFP-WAP-HNP-3电转到减毒猪霍乱沙门菌C78-1△crp感受态,构建重组沙门菌C78-1△crp( pEGFP-WAP-HNP-3),并进一步研究其生物学特性。结果 PCR和测序结果表明C78-1△crp(pEGFP-WAP-HNP-3)构建成功。进行生物学特性分析表明,重组菌与亲本株C78-1相比失去了利用麦芽糖、鼠李糖等的能力,生长速度显著减慢,能够稳定遗传所携带的HNP-3基因,重组菌株的毒力约是亲本株C78-1的1/300,且重组菌注射到兔乳腺后的分泌乳中能够检测到HNP-3融合蛋白条带。结论重组菌C78-1△crp(pEGFP-WAP-HNP-3)构建成功,并能够分泌HNP-3融合蛋白,为进一步研究重组菌的功能提供基础资料。
作者：陈慧敏；李银聚；张鹏；陈松彪；张春杰；程相朝
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2016 年 36卷 11期
