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目的 通过研究细胞自噬在甲型流感病毒H1 N1感染细胞过程中对病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响,为进一步阐明流感病毒感染机制提供实验资料.方法 利用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制细胞自噬,流式细胞术检测3-MA对细胞凋亡的影响,激光共聚焦显微镜观察H1N1感染A549细胞后的自噬现象,利用real-time PCR检测自噬被抑制前后病毒拷贝数的变化以及Ⅰ型干扰素(typeⅠinterferon,IFN-Ⅰ)产生通路各基因mRNA表达量的变化.分析细胞自噬对病毒复制及干扰素表达的影响.结果 当H1N1感染A549细胞后可诱导细胞产生不完全自噬,导致自噬体积累.当自噬被3-MA抑制后,TLR3-TLR7-MyD88-IRF7-IFN-α/β信号通路各基因mRNA表达量上调,与此同时病毒拷贝数及血凝滴度下调.结论 H1N1可能通过诱导不完全自噬逃逸了机体的抗病毒固有免疫应答,促进了自身复制和存活.

作者:李嘉祺;胡雅洁;宋杰;李洪哲;王晶晶;郭磊;郑惠文;宁若彤;范海涛

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 2期

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作者:
李嘉祺;胡雅洁;宋杰;李洪哲;王晶晶;郭磊;郑惠文;宁若彤;范海涛
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 2期
标签:
细胞自噬 甲型流感病毒 A549细胞 Ⅰ型干扰素 Autophagy Influenza A virus A549 cell TypeⅠ interferon
目的 通过研究细胞自噬在甲型流感病毒H1 N1感染细胞过程中对病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响,为进一步阐明流感病毒感染机制提供实验资料.方法 利用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制细胞自噬,流式细胞术检测3-MA对细胞凋亡的影响,激光共聚焦显微镜观察H1N1感染A549细胞后的自噬现象,利用real-time PCR检测自噬被抑制前后病毒拷贝数的变化以及Ⅰ型干扰素(typeⅠinterferon,IFN-Ⅰ)产生通路各基因mRNA表达量的变化.分析细胞自噬对病毒复制及干扰素表达的影响.结果 当H1N1感染A549细胞后可诱导细胞产生不完全自噬,导致自噬体积累.当自噬被3-MA抑制后,TLR3-TLR7-MyD88-IRF7-IFN-α/β信号通路各基因mRNA表达量上调,与此同时病毒拷贝数及血凝滴度下调.结论 H1N1可能通过诱导不完全自噬逃逸了机体的抗病毒固有免疫应答,促进了自身复制和存活.