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目的 了解人单核-巨噬细胞和中性粒细胞杀灭问号钩端螺旋体(简称钩体)能力差异及其机制.方法 人THP-1单核细胞和HL-60细胞分别用佛波酯(PMA)和全反式维甲酸(ATRA)预处理,使其分化为单核-巨噬细胞和中性粒细胞.采用激光共聚焦显微镜法检测问号钩体黄疸出血群赖型赖株感染THP-1单核-巨噬细胞和HL-60中性粒细胞内总活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)水平和游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化.采用荧光分光光度法检测总ROS、NO抑制剂和胞内游离Ca2+螯合剂(NAC、SMT和BAPTA/AM)作用前后THP-1单核-巨噬细胞和HL-60中性粒细胞杀灭胞内问号钩体的能力及其差异.结果 THP-1单核-巨噬细胞和HL-60中性粒细胞感染问号钩体后总ROS、NO水平和[Ca2+]i均显著升高(P<0.05),但前者总ROS、NO水平和[Ca2+]i显著高于后者(P<0.05).THP-1单核-巨噬细胞杀灭胞内问号钩体能力显著强于HL-60中性粒细胞(P<0.05).抑制胞内总ROS、NO和游离Ca2+可导致THP-1单核-巨噬细胞杀灭胞内问号钩体能力显著下降(P<0.05),但对HL-60中性粒细胞无明显影响.结论 单核-巨噬细胞而非中性粒细胞是感染时清除问号钩体的主要吞噬细胞,高水平总ROS、NO和胞内游离Ca2+与单核-巨噬细胞杀灭问号钩体能力密切相关.

作者:阮萍;林旭瑷;张颖颖;周海丽;严杰;陈旭

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 6期

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作者:
阮萍;林旭瑷;张颖颖;周海丽;严杰;陈旭
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 6期
标签:
问号钩端螺旋体 单核-巨噬细胞 中性粒细胞 活性氧 一氧化氮 胞内游离Ca2+ Leptospira interrogans Mononuclear macrophage Neutrophil Reactive oxygen species Nitric oxide Intracellular free Ca2+
目的 了解人单核-巨噬细胞和中性粒细胞杀灭问号钩端螺旋体(简称钩体)能力差异及其机制.方法 人THP-1单核细胞和HL-60细胞分别用佛波酯(PMA)和全反式维甲酸(ATRA)预处理,使其分化为单核-巨噬细胞和中性粒细胞.采用激光共聚焦显微镜法检测问号钩体黄疸出血群赖型赖株感染THP-1单核-巨噬细胞和HL-60中性粒细胞内总活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)水平和游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化.采用荧光分光光度法检测总ROS、NO抑制剂和胞内游离Ca2+螯合剂(NAC、SMT和BAPTA/AM)作用前后THP-1单核-巨噬细胞和HL-60中性粒细胞杀灭胞内问号钩体的能力及其差异.结果 THP-1单核-巨噬细胞和HL-60中性粒细胞感染问号钩体后总ROS、NO水平和[Ca2+]i均显著升高(P<0.05),但前者总ROS、NO水平和[Ca2+]i显著高于后者(P<0.05).THP-1单核-巨噬细胞杀灭胞内问号钩体能力显著强于HL-60中性粒细胞(P<0.05).抑制胞内总ROS、NO和游离Ca2+可导致THP-1单核-巨噬细胞杀灭胞内问号钩体能力显著下降(P<0.05),但对HL-60中性粒细胞无明显影响.结论 单核-巨噬细胞而非中性粒细胞是感染时清除问号钩体的主要吞噬细胞,高水平总ROS、NO和胞内游离Ca2+与单核-巨噬细胞杀灭问号钩体能力密切相关.