目的 构建新疆出血热病毒(Xinjiang hemorrhagic fever virus,XHFV)糖蛋白两个区段抗原的DNA疫苗,并观察其免疫应答效果.方法 分别将XHFV YL04057株糖蛋白Gc上的两个抗原区段GcⅠ(1 229~1 349 aa)和GcⅡ(1 443~1 566 aa)编码的DNA序列插入真核表达载体pVAX1中,构建真核质粒pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ;经酶切和测序鉴定,质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验、细胞因子含量测定和ELISA法检测抗体对其诱导的免疫应答效果进行评价.结果 经双酶切鉴定和测序证实重组质粒构建正确;实验组小鼠IgG产生水平与pVAX1对照组相比有明显升高;pVAX1-GcⅠ和pVAX1-GcⅡ免疫组小鼠血清中的抗体效价均高于1:3 200;pVAX1-GcⅡ免疫组的小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,IFN-γ的表达水平也高达160.27 pg/ml,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 成功构建XHFV糖蛋白两个区段抗原DNA疫苗,靶抗原在体内可有效表达;各免疫组均激起了较强的体液免疫及细胞免疫应答,pVAX1-GcⅡ实验组免疫原性和免疫效果较好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗.
作者:汪梅芳;郭超凡;朱华兵;陈丽娟;张渝疆;孙素荣
来源:中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 6期