目的 观察原代人脐静脉内皮细胞(primary human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)被登革热2型病毒(dengue virus 2,DENV-2)感染后,与人外周血巨噬细胞(macrophages,M?)共培养,两种细胞主要炎性因子产生的变化.方法 密度梯度离心法从人体外周血浓缩白细胞中分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),贴壁得到单核细胞,通过巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激,流式细胞术检测CD14+CD11b+细胞纯度,得到M?.DENV-2感染HUVECs,real-time PCR检测HUVECs细胞内病毒NS1 mRNA表达量变化.HUVECs被DENV-2感染后,通过Transwell法与M?共培养,对照组用鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)1型特异性受体激动剂CYM-5442预处理24 h去除药物后感染病毒.Real-time PCR分别检测HUVECs产生的IL-6、IL-8 mRNA和M?产生的IL-6、IL-8、TNF-α、IL-1βmRNA的逆转录水平;ELISA双抗体夹心法检测培养上清中上述细胞因子的表达.结果 HUVECs DENV-2被感染后,细胞内NS1基因转录水平逐渐上升,24 h时达峰值(2.66±0.53,P<0.05)后下降.流式细胞术检测M?纯度为(89.16±2.07)％.HUVECs被DENV-2感染后IL-6、IL-8 mRNA转录水平均上调,24 h mRNA转录量达到峰值;IL-6为16.10±0.17,IL-8为29.76±0.58.未感染组转录水

作者：来涛；左丽；罗玉；毛佳璇；陈俊豪；周恩正

来源：中华微生物学和免疫学杂志 2019 年 39卷 6期