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目的 通过剔除和移植调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)正反两个方面来研究Treg细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)疾病发展中的作用,探讨Treg细胞在EAE病程发展中扮演的角色.方法 首先通过注射抗小鼠CD25的单克隆抗体来剔除小鼠体内天然产生的Treg细胞,再利用人工合成的MOG35-55短肽对小鼠进行EAE诱导,观察和比较Treg细胞剔除和未剔除的小鼠在EAE病程中EAE评分上的差异.利用流式细胞术分析小鼠体内CD4+Foxp3+的Treg细胞数量和比例在EAE病程中的动态变化.用磁性激活细胞分选术(MACS)和荧光激活细胞分选术(FACS)相结合的方法,从Foxp3GFP+转基因小鼠中分离出GFP标记的Treg细胞,然后将分离出的GFP标记Treg细胞通过尾静脉注射到免疫后6 d的EAE小鼠体内,观察Treg细胞移植对EAE小鼠的治疗效果.结果 在给小鼠注射抗CD25的单克隆抗体后,流式细胞术检测表明小鼠血液中天然产生的Treg细胞剔除率大于95%.经EAE诱导后,与对照组(注射PBS)小鼠相比,Treg细胞剔除小鼠的疾病程度更为严重,差异显著.通过流式细胞术分析Treg细胞在整个EAE病程中的动态变化,发现在EAE诱导后的第6天,小鼠血液中CD4+Foxp3+的Treg细胞比例最低(约11%),因而我们把EAE诱导后6 d作为Treg细胞移

作者:高海瑶;李萌;丰慧根;林俊堂;李永海

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2019 年 39卷 10期

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作者:
高海瑶;李萌;丰慧根;林俊堂;李永海
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2019 年 39卷 10期
标签:
多发性硬化症 实验性自身免疫性脑脊髓炎 调节性T细胞 Multiple sclerosis Experimental autoimmune encephalomyelitis Regulatory T cell
目的 通过剔除和移植调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)正反两个方面来研究Treg细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)疾病发展中的作用,探讨Treg细胞在EAE病程发展中扮演的角色.方法 首先通过注射抗小鼠CD25的单克隆抗体来剔除小鼠体内天然产生的Treg细胞,再利用人工合成的MOG35-55短肽对小鼠进行EAE诱导,观察和比较Treg细胞剔除和未剔除的小鼠在EAE病程中EAE评分上的差异.利用流式细胞术分析小鼠体内CD4+Foxp3+的Treg细胞数量和比例在EAE病程中的动态变化.用磁性激活细胞分选术(MACS)和荧光激活细胞分选术(FACS)相结合的方法,从Foxp3GFP+转基因小鼠中分离出GFP标记的Treg细胞,然后将分离出的GFP标记Treg细胞通过尾静脉注射到免疫后6 d的EAE小鼠体内,观察Treg细胞移植对EAE小鼠的治疗效果.结果 在给小鼠注射抗CD25的单克隆抗体后,流式细胞术检测表明小鼠血液中天然产生的Treg细胞剔除率大于95%.经EAE诱导后,与对照组(注射PBS)小鼠相比,Treg细胞剔除小鼠的疾病程度更为严重,差异显著.通过流式细胞术分析Treg细胞在整个EAE病程中的动态变化,发现在EAE诱导后的第6天,小鼠血液中CD4+Foxp3+的Treg细胞比例最低(约11%),因而我们把EAE诱导后6 d作为Treg细胞移