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目的:探讨解脲脲原体GrpE蛋白( Ureaplasma urealyticum GrpE, Uu-GrpE)对树突状细胞成熟的影响及其对T细胞极化的作用。 方法:表达纯化 Uu-GrpE蛋白并利用Western blot鉴定。分离培养小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs),利用LDH试剂盒分析 Uu-GrpE的细胞毒性,流式细胞术检测 Uu-GrpE对BMDCs表面共刺激分子CD80和CD86以及主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex Ⅱ,MHCⅡ)表达的影响,ELISA检测其刺激BMDCs后IL-12p70、TNF-α、IL-1β和IL-6等细胞因子的表达;磁珠分选同系异体小鼠的脾脏中初始CD4 +T细胞(CD4 +Na?ve T细胞),通过构建BMDCs与Na?ve T细胞共培养体系分析 Uu-GrpE刺激成熟的BMDCs(GrpE-BMDCs)对Na?ve T细胞增殖及极化的影响。GrpE-BMDCs经尾静脉注射免疫小鼠并利用ELISA和流式细胞术观察其所诱导的特异性体液和细胞免疫应答。 结果:成功表达 Uu-GrpE并分离出高纯度BMDCs, Uu-GrpE可刺激BMDCs分泌IL-12p70、TNF-α、IL-1β和IL-6等细胞因子且无细胞毒性;同时 Uu-GrpE可显著增加BMDCs表面分子CD80[平均荧光强度(mean flourscence indensity,

作者:郭方毅;唐艳红;袁红霞;张文君;向璟;刘鹏琴;滕文友;李冉辉;代国知

来源:中华微生物学和免疫学杂志 2022 年 42卷 1期

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作者:
郭方毅;唐艳红;袁红霞;张文君;向璟;刘鹏琴;滕文友;李冉辉;代国知
来源:
中华微生物学和免疫学杂志 2022 年 42卷 1期
标签:
解脲脲原体 GrpE 树突状细胞 免疫应答 Ureaplasma urealyticum GrpE Dendritic cell Immune response
目的:探讨解脲脲原体GrpE蛋白( Ureaplasma urealyticum GrpE, Uu-GrpE)对树突状细胞成熟的影响及其对T细胞极化的作用。 方法:表达纯化 Uu-GrpE蛋白并利用Western blot鉴定。分离培养小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs),利用LDH试剂盒分析 Uu-GrpE的细胞毒性,流式细胞术检测 Uu-GrpE对BMDCs表面共刺激分子CD80和CD86以及主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(major histocompatibility complex Ⅱ,MHCⅡ)表达的影响,ELISA检测其刺激BMDCs后IL-12p70、TNF-α、IL-1β和IL-6等细胞因子的表达;磁珠分选同系异体小鼠的脾脏中初始CD4 +T细胞(CD4 +Na?ve T细胞),通过构建BMDCs与Na?ve T细胞共培养体系分析 Uu-GrpE刺激成熟的BMDCs(GrpE-BMDCs)对Na?ve T细胞增殖及极化的影响。GrpE-BMDCs经尾静脉注射免疫小鼠并利用ELISA和流式细胞术观察其所诱导的特异性体液和细胞免疫应答。 结果:成功表达 Uu-GrpE并分离出高纯度BMDCs, Uu-GrpE可刺激BMDCs分泌IL-12p70、TNF-α、IL-1β和IL-6等细胞因子且无细胞毒性;同时 Uu-GrpE可显著增加BMDCs表面分子CD80[平均荧光强度(mean flourscence indensity,