目的 探讨在前列腺癌细胞系LNCaP 中分选和鉴定干祖(S/P)细胞的方法.方法 常规培养前列腺癌细胞系LNCaP,用CD133 和CD44 抗体标记细胞,流式细胞术分选,条件培养液培养分选出的S/P 细胞,用定量RT-PCR、Western blot 和免疫荧光染色方法检测S/P 细胞CD133、α2β1 整合素、雄激素受体(AR)、CK5、CK8 和PSA 的表达,前列腺细胞球体形成实验检测S/P 细胞自我更新能力,琼脂糖凝胶克隆形成实验检测S/P 细胞成瘤能力.各指标两组间差异比较采用独立t 检验.结果 采用流式细胞术可以分选出约占1 ﹪的S/P 细胞,与非S/P 细胞相比,S/P 细胞CK5、CD133、α2β1 整合素表达增高(mRNA 表达比较,t = 17.376,3.859,8.611 ;P = 0.000,0.021,0.001),CK8、AR 和PSA 的表达明显下降(mRNA 表达比较,t = 3.518,11.372,3.845 ;P = 0.029,0.000,0.018).细胞培养14 d 后,非S/P细胞和S/P 细胞形成前列腺球的数量分别为(4.35 ± 0.87)个和(35.12 ± 4.56)个,两者比较差异具有统计学意义(t = 13.013,P = 0.000).细胞培养14 d 后,非S/P 细胞和S/P 细胞可以在软琼脂凝胶中克隆性生长,阳性克隆数分别为(18.34 ± 1.21) 个克隆和(82.27 ± 7.54)个克隆,两者比较差异有显著意义(t = 8.617,P = 0.001).结论 前列腺癌LNCaP 细胞系中存在占极少数

作者：马志方；许召良；岳亮；郝振文；王东文

来源：中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2012 年 2卷 4期