目的 研究胎盘特异性基因1 (PLAC1)特异性T细胞受体(TCR)基因修饰T细胞对乳腺癌的抗肿瘤作用.方法 磁珠分选人类白细胞抗原分型为A2 (HLA-A2)的志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中的CD8+T细胞,流式检测CD8+T细胞的表型.通过慢病毒载体构建、包装,将可识别乳腺癌肿瘤抗原PLAC1的HLA-A2限制性的TCR基因导入CD8+T细胞(称为TCR-T细胞),以慢病毒空载体包装、感染的CD8+T细胞(NC-T细胞)作为对照细胞,通过流式细胞术检测PLAC1特异性TCR的表达效率.免疫荧光和流式细胞术检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(三阴性乳腺癌细胞)的PLAC1和HLA-A2血清型的表达.WST-1法检测不同效靶比(5∶1、10∶1和20∶1)TCR-T细胞或NC-T细胞与乳腺癌细胞MCF-7或MDA-MB-231作用后的细胞毒性,并通过ELISA检测共培养后T细胞IFN-γ的释放量.通过裸鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型检测TCR-T细胞以及NC-T细胞的抗肿瘤作用.采用单因素方差分析及独立t检验进行统计学分析.结果 磁珠分选出的CD8+T细胞CD3+ CD8+比例达到(98.89±0.30)％.经慢病毒感染、五聚体检测,TCR-T细胞中PLAC1特异性TCR的正确表达率为(24.58±0.82)％,NC-T细胞不表达PLAC1特异性TCR.免疫荧光和流式结果显示乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231为HLA-A2和PLAC1双阳性表达细胞.其中流式检测结果

作者：李琼书；成先义；胡源；陈洁莹；巩秀；肖东；胡祥；刘未斌

来源：中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2018 年 8卷 2期