目的 观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管生成中的作用.方法 将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴(CoCl2),200μmol/L]诱导,再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT(30μmol/L,24 h)和激活剂JAG-1(30μmol/L,24 h)干预.通过体外小管形成实验观察低氧对HUVEC血管生成能力的影响.应用RT-PCR和Western blot检测HUVEC中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Notch1信号分子(Notch1、Dell4和JAG-1)的mRNA和蛋白表达.通过Transwell迁移实验和伤口愈合实验观察低氧、DAPT、JAG-1对HUVEC迁移能力的影响.应用MTT法检测低氧及Notch1对HUVEC增殖的影响.两组间比较采用t检验,采用析因设计方差分析低氧和DAPT以及低氧和JAG-1对HUVEC迁移能力、距离、小管形成能力和细胞增殖的交互作用.结果 与常氧组比较,低氧组小管总长[(8.18±0.62)mm比(15.43±1.32)mm]增高,差异具有统计学意义(P<0.05).与常氧组比较,低氧组的HIF-1α、VEGF、MMP-9、Notch1、Dell4和JAG-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量(1.01±0.03比4.43±0.35,1.02±0.03比3.55±0.28,0.98±0.04比3.24±0.25,1.01±0.03比3.22±0.25,0.99±0.02比2.89±0.22,1.02
作者:石紫云;李艳川;刘飞飞;张雅;袁晓华;王淑娥
来源:中华细胞与干细胞杂志(电子版) 2020 年 10卷 3期