目的:探究miR-148/152家族在多能干细胞衍生内皮细胞（ECs）中对糖酵解相关基因的调控作用。方法:本研究以人胚胎干细胞（hESCs）株H1（WT）和采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建的miR-148/152家族全敲除多能干细胞系（TKO）为基础；利用免疫荧光技术检测干细胞标志物NANOG的表达，评估WT和TKO干细胞的多能性；通过添加化学小分子和细胞因子如Wnt信号通路激活剂、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子和骨形态发生蛋白4等，定向诱导hESCs向ECs分化；采用RT-qPCR检测miR-148/152家族在ECs中的敲除效率，并探究糖酵解关键酶和代谢转换关键基因在WT和TKO干细胞分化ECs中的表达差异。两组间比较采用独立样本t检验。结果:与WT比较，TKO多能干细胞中miR-148a（1.00±0.03比0.00±0.00）、miR-148b（1.00±0.07比0.13±0.06）、miR-152（1.01±0.15比0.05±0.03）丰度降低，差异具有统计学意义（P均< 0.001）。WT和TKO hESCs均表达核定位的多能性标志分子NANOG，且均可定向分化为CD31阳性的ECs。与WT比较，TKO ECs中miR-148a（1.00±0.05比0.00±0.00）、miR- 148b（1.00±0.08比0.12±0.05）、miR-152（1.00±0.08比0.13±0.07）检测丰度降低，差异具有统计学意义（P均< 0.001）。与WT比较，TKO ECs中糖酵解

作者：丁丰悦；武宏春；黄莹；殷为民；雷伟

来源：中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2021 年 11卷 6期