目的 探讨联合应用靶向血管内皮生长因子(VEGF)小干扰RNA(siRNA)与双自杀基因yCDglyTK对人胃癌细胞的体外杀伤作用。方法 以磷酸钙纳米颗粒为载体介导空白质粒pcDNA3.1（-）null(空白质粒组)、靶向VEGF的干扰质粒pGenesil-shVEGF(干扰质粒组)、双自杀基因质粒pcDNA3.1（-）CV-yCDglyTK(双自杀基因组)及联合基因质粒pcDNA3.1（-）shVEGF-yCDglyTK（联合基因组）转染胃癌SGC7901细胞，未转染的胃癌细胞为空白对照组，经G418筛选稳定转染的胃癌细胞株，采用RT-PCR和免疫印迹法验证目的基因表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-FC)后，通过四甲基偶氮唑盐(MTT)生长曲线、旁观者效应实验、Hoechst 33258染色及流式细胞术，观察各组细胞的生物学特性变化、凋亡细胞形态及凋亡率。采用SPSS 13.0统计学软件进行数据处理分析，组间多重比较采用LSD检验。结果成功建立4种转染不同质粒的胃癌细胞株，联合基因组及双自杀基因组均可检测到双自杀基因yCDglyTK的表达。MTT生长曲线显示5-FC作用24 h后，与空白对照组和空白质粒组相比，干扰质粒组、双自杀基因组及联合基因组吸光度值明显降低(P＜0.01)。当稳定转染联合基因的SGC7901细胞占60％、80％和100％时，细胞相对存活率分别为13.09％±2.40％、9.74％±2.83％及5.68％
作者：叶玲；张桂英；陈选民；冷爱民；彭杰；李新华；易红；刘霆
来源：中华消化杂志 2011 年 31卷 8期
