目的::应用膜片钳单通道技术研究镁离子(Mg
2+)对原代培养猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)的影响。
方法::选择培养5天后的单个梭形平滑肌细胞,用二步拉制经热抛光尖端直径约1~2μm,充灌液体后阻抗约5~7MΩ的微吸管进行高阻封接,在对称性高钾溶液下采用内面向外式膜片记录电流。单通道电流信号经膜片钳放大器放大、滤波(3K Hz)后,经12位A/D、D/A转换器在pClamp 6.0.2专用软件支持下输入并储存在计算机内,然后进行分析处理。结果::猪冠状动脉平滑肌细胞KCa单通道电导值为135±15pS,[Ca
2+]i为10
-7mol,膜电位为+40mV,向膜内侧液加入Mg
2+至1和4mmol,通道活度(NPo)显著增加;并发现随着[Mg
2+]i从0.5mmol依次增加至14mmol,Mg
2+对KCa通道可产生浓度依赖性激活作用;而且用一定浓度的EGTA把[Ca
2+]i螯合到很小时(<10
-9mol),再向膜内侧加入Mg
2+(4 mmol)仍对通道有激活作用。
结论::[Mg
2+]i对KCa通道可产生浓度依赖性激活作用,且在膜内侧相对无Ca
2+的情况下仍可激活KCa通道,这可能是Mg
2+舒张血管平滑肌的作用机制之一。
作者:喻卓;梁立权;周兰清;任国钧;曾晓荣
来源:中华心律失常学杂志 1997 年 01卷 2期