目的 探讨丙戊酸(VPA)对脂肪源性干细胞(ADSCs)的诱导分化作用. 方法 2016年11月至2017年10月,取3周龄SD大鼠2只,体外分离、培养ADSCs并传至第3代;经含10 ng/ml bFGF的完全培养液培养24h后,分4组.空白对照组(A组)仅加入D-Hank液;实验组加入不同浓度VPA对其进行诱导:B、C、D组分别每孔加入0.5、1.0和10.0 mmol/L丙戊酸200μl.每天观察细胞形态变化.培养7d后采用实时荧光定量PCR检测各组细胞神经组织蛋白(S-100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及巢蛋白(Nestin)基因表达,免疫荧光染色检测S-100蛋白表达.t检验进行组间比较,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 培养4d后B、C、D组细胞经VPA诱导后逐渐出现许旺细胞样或神经细胞样形态改变,以C组变化最为明显;A组细胞形态未见明显改变,仍以梭形或圆形为主.S-100免疫荧光染色示,B、C、D组染色阳性率较高,以C组阳性率最高;A、D组细胞阳性率较少,其中A组最少.实时荧光定量PCR检测示,S-100基因表达量随VPA浓度升高呈上升趋势,在丙戊酸浓度为1.0 mmol/L时达到峰值,之后开始缓慢下降;C组表达量显著高于A、B、D组(P＜0.05),B、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).NSE基因表达与S-100呈相同趋势,且C组表达量显著高于A、B、D组(P＜0.05),B、D组间差异亦有统计学意义(P＜0.05).Nest
作者：吴飞；贾婷；杨越；孙志博；刘丰；张向阳
来源：中华显微外科杂志 2018 年 41卷 4期
