目的 研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为心肌样细胞的能力及其机制.方法 分离大鼠BMSC,并在体外培养纯化.实验分为两个部分:第一部分,IGF-1诱导BMSC分化为心肌样细胞的实验研究,分为培养基对照组(对照组)和15 ng/ml的IGF-1诱导组(IGF-1组),连续培养21 d,分别在第3、7、14和21天采用免疫细胞化学染色法和Western blot法检测BMSC中磷酸化(p) IGF-1受体(R)、心肌特异性肌钙蛋白T(TNT)及肌钙蛋白I(TNI)的表达.第二部分为IGF-1R激酶阻断剂I-OMe AG538阻断IGF-1诱导BMSC向心肌样细胞分化的实验研究,分为培养基对照组(对照组)、15 ng/ml IGF-1诱导组(IGF-1组)、300 nmol/L I-OMe AG538阻断组(I-OMe AG538组)及300 nmol/L I-OMe AG538阻断+15 ng/ml IGF-1诱导组(I-OMe AG538+ IGF-1组).免疫细胞化学法和Western blot法检测BMSC中TNT及TNI、MAPK和PI3K信号通路的蛋白表达水平.结果 IGF-1诱导BMSC分化的实验结果显示IGF-1组诱导后,TNT、TNI的表达均呈阳性,pIGF-1R的表达量也明显高于对照组(上述因子均未检测到),以第14天为最高(P<0.05).I-OMeAG538作用BMSC 3和6h后,I-OMe AG538组pERK1/2/ERK1/2比值分别为0.17±0.03和0.06±0.03,均显著低于对照组的1.00±0.05(P均<0.05).IGF-1组pAK
作者:王秀力;李春梅;吕茜;王雷;王洁;宫海滨
来源:中华心血管病杂志 2013 年 41卷 2期