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目的 观察辛伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的内皮细胞氧化应激损伤的保护作用,并初步探讨其机制.方法 体外分离培养人脐静脉内皮细胞后分为6组,分别是对照组、ox-LDL处理组(ox-LDL组)、辛伐他汀溶剂+ox-LDL组(溶剂对照组),辛伐他汀0.1 μmol/L+ ox-LDL组、辛伐他汀0.5 μmol/L+ ox-LDL组和辛伐他汀1.0 μmol/L+ox-LDL组.ox-LDL处理组直接给予ox-LDL(120 μg/ml)刺激24 h.辛伐他汀+ox-LDL组分别采用不同浓度的辛伐他汀(0.1、0.5和1.0 μmol/L)预先孵育人脐静脉内皮细胞30 rin,再给予ox-LDL(120 μg/ml)刺激24 h.荧光分光光度法测定胞内活性氧簇(ROS)的水平.化学发光法测定胞内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)活性.RT-PCR测定NADPH氧化酶亚基p22phox、gp91phox、p47phox和p67phoxmRNA的表达水平.免疫共沉淀以及免疫印迹方法测定p47 phox与p22phox(p47 phox/p22phox)的蛋白结合量.结果 ox-LDL组ROS水平和NADPH氧化酶活性均显著高于对照组[分别为1.507±0.048比0.442±0.021(P<0.01)和(87.90±10.34) RLU·s-1·mg-1比(38.52±4.20) RLU·s-1·mg-1(P<0.01)],p22phox、gp91 phox、p47phox和p67phox mRNA水平亦均显著高于对照组(P均<0.01),

作者:张磊善;郭锐;崔立宝

来源:中华心血管病杂志 2014 年 42卷 1期

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张磊善;郭锐;崔立宝
来源:
中华心血管病杂志 2014 年 42卷 1期
标签:
内皮细胞 斯伐他汀 脂蛋白类,LDL 氧化性应激 Endothelial cells Simvastatin Lipoproteins,LDL Oxidative stress
目的 观察辛伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的内皮细胞氧化应激损伤的保护作用,并初步探讨其机制.方法 体外分离培养人脐静脉内皮细胞后分为6组,分别是对照组、ox-LDL处理组(ox-LDL组)、辛伐他汀溶剂+ox-LDL组(溶剂对照组),辛伐他汀0.1 μmol/L+ ox-LDL组、辛伐他汀0.5 μmol/L+ ox-LDL组和辛伐他汀1.0 μmol/L+ox-LDL组.ox-LDL处理组直接给予ox-LDL(120 μg/ml)刺激24 h.辛伐他汀+ox-LDL组分别采用不同浓度的辛伐他汀(0.1、0.5和1.0 μmol/L)预先孵育人脐静脉内皮细胞30 rin,再给予ox-LDL(120 μg/ml)刺激24 h.荧光分光光度法测定胞内活性氧簇(ROS)的水平.化学发光法测定胞内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)活性.RT-PCR测定NADPH氧化酶亚基p22phox、gp91phox、p47phox和p67phoxmRNA的表达水平.免疫共沉淀以及免疫印迹方法测定p47 phox与p22phox(p47 phox/p22phox)的蛋白结合量.结果 ox-LDL组ROS水平和NADPH氧化酶活性均显著高于对照组[分别为1.507±0.048比0.442±0.021(P<0.01)和(87.90±10.34) RLU·s-1·mg-1比(38.52±4.20) RLU·s-1·mg-1(P<0.01)],p22phox、gp91 phox、p47phox和p67phox mRNA水平亦均显著高于对照组(P均<0.01),