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目的 研究载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)对小鼠体内鞘氨醇-1-磷酸(S1P)在脂蛋白上分布的影响及作用机制.方法 分别给予普通生长繁殖饲料喂养Apo E-/-及野生型雄鼠、雌鼠各5只,饲养小鼠至周龄32周,处死小鼠并收集血浆,采用超速离心技术分离出血浆脂蛋白组分[极低密度脂蛋白脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)],采用BCA试剂盒检测各组分的蛋白浓度,液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测小鼠血浆S1P和脂蛋白组分上S1P的浓度,用Western bolt检测S1P特异性配体载脂蛋白M(Apo M)的蛋白表达.比较Apo E-/-组与野生型组中S1P在血浆及脂蛋白组分上的水平;比较两组中脂蛋白组分标准化后的S1P的水平及两组中Apo M在血浆、肝脏、肾脏的表达.结果 Apo E-/-小鼠血浆S1P水平高于野生型组[雄鼠组:(535.7±78.5) nmol/L比(263.3±22.0)nmol/L;雌鼠组:(601.1±64.0) nmol/L比(279.0±33.9)nmol/L;P均<0.01].Apo E-/-组小鼠S1P在非-HDL(合并LDL及VLDL组分)的水平高于野生型组[雄鼠组(504.9±52.8)比(28.7±9.0) nmol/L;雌鼠组:(427.7±27.4)比(27.8±4.7) nmol/L;P均<0.01;蛋白标准化后,雄鼠组:(385.0±41.2) pmol/mg蛋白比(71.4±6.6) pmol/mg蛋白;雌鼠组:(330.2±22.0)pmol/mg蛋白比(67.2±12.1)pmol/mg蛋

作者:杨鑫泉;于杨;郭守东;崔英杰;胡国良;冯蕾;王大新;秦树存

来源:中华心血管病杂志 2017 年 45卷 5期

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作者:
杨鑫泉;于杨;郭守东;崔英杰;胡国良;冯蕾;王大新;秦树存
来源:
中华心血管病杂志 2017 年 45卷 5期
标签:
动脉粥样硬化 载脂蛋白E 小鼠,基因敲除 脂蛋白类 Atherosclerosis Apolipoprotein E Mice,knockout Lipoproteins
目的 研究载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)对小鼠体内鞘氨醇-1-磷酸(S1P)在脂蛋白上分布的影响及作用机制.方法 分别给予普通生长繁殖饲料喂养Apo E-/-及野生型雄鼠、雌鼠各5只,饲养小鼠至周龄32周,处死小鼠并收集血浆,采用超速离心技术分离出血浆脂蛋白组分[极低密度脂蛋白脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)],采用BCA试剂盒检测各组分的蛋白浓度,液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测小鼠血浆S1P和脂蛋白组分上S1P的浓度,用Western bolt检测S1P特异性配体载脂蛋白M(Apo M)的蛋白表达.比较Apo E-/-组与野生型组中S1P在血浆及脂蛋白组分上的水平;比较两组中脂蛋白组分标准化后的S1P的水平及两组中Apo M在血浆、肝脏、肾脏的表达.结果 Apo E-/-小鼠血浆S1P水平高于野生型组[雄鼠组:(535.7±78.5) nmol/L比(263.3±22.0)nmol/L;雌鼠组:(601.1±64.0) nmol/L比(279.0±33.9)nmol/L;P均<0.01].Apo E-/-组小鼠S1P在非-HDL(合并LDL及VLDL组分)的水平高于野生型组[雄鼠组(504.9±52.8)比(28.7±9.0) nmol/L;雌鼠组:(427.7±27.4)比(27.8±4.7) nmol/L;P均<0.01;蛋白标准化后,雄鼠组:(385.0±41.2) pmol/mg蛋白比(71.4±6.6) pmol/mg蛋白;雌鼠组:(330.2±22.0)pmol/mg蛋白比(67.2±12.1)pmol/mg蛋