目的：检测肺癌细胞系A549中PEBP4的异位表达与顺铂（ DDP）诱导的细胞毒性之间的关系，并探讨其相关作用机制。方法构建pcDNA3-PEBP4重组质粒，转染肺癌细胞A549，检测各组A549细胞中PEBP4的表达。 MTT分别检测转染A549细胞，并在DDP作用48 h后，各组A549细胞活力的变化；检测各组A549细胞凋亡的变化和p53蛋白的表达变化。应用荧光素酶报告基因系统验证PEBP4是miR-34a的靶基因，并采用蛋白印迹法检测miR-34a对A549细胞中PEBP4蛋白表达的影响。结果 pcDNA3-PEBP4转染组PEBP4蛋白的表达显著高于正常对照组和PEBP4 shRNA转染对照组（ P＜0.01）。 DDP作用48 h 后， DDP 加药组的A549细胞活力显著低于正常对照组（ P ＜0.01）；pcDNA3-PEBP4转染组A549细胞活力低于正常对照组（ P＜0.05）；而PEBP4 shRNA 转染组细胞活力则显著低于正常对照组（ P＜0.01）和DDP加药组（ P＜0.05）。流式细胞仪检测结果和蛋白印迹法检测结果显示：DDP加药组的凋亡细胞数和p53蛋白的表达水平显著高于正常对照组（ P＜0.01）；pcDNA3-PEBP4转染组凋亡细胞数和p53的表达水平高于正常对照组（P＜0.05），却低于DDP加药组和PEBP4 shRNA转染组（P＜0.05）；而PEBP4 shRNA转染组凋亡细胞数和p53的表达水平则显著高于正常对照组（P＜0
作者：虞桂平；黄斌；陈国强
来源：中华胸心血管外科杂志 2016 年 32卷 11期
