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目的 建立小鼠原位左肺移植模型,探究抗CD3单抗缓解肺移植急性排斥损伤的作用机制,为其在临床肺移植的应用提供理论依据.方法 选取SPF级野生型BALB/c和C57BL/6小鼠,构建原位左肺移植模型,设置同种同型对照组(C57BL/6→C57BL/6,6只)、同种异型对照组(BALB/c→C57BL/6,6只),同种异型单抗处理组(BALB/c→C57BL/6,4只).术后第2~6天及第9天每日腹腔注射50 g抗CD3单抗.采用苏木精-伊红、马松染色以及CD3/髓过氧化物酶(MPO)免疫组化染色,观察各组移植肺T淋巴细胞和中性粒细胞浸润分布情况,进行急性排斥病理评分;实时荧光定量RT-PCR检测移植肺组织转录因子FoxP3和细胞因子IL-17A、IFN-γ的mRNA表达水平;流式细胞术检测受体小鼠脾脏中FoxP3+调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比例.结果 移植术后10天,同种同型组移植肺外观呈淡红色,柔软有弹性,病理学检测未见明显的炎症细胞浸润和组织损伤;同种异型对照组移植肺外观呈绛紫色,硬度增加;同种异型单抗处理组外观淡红柔软,与同种异型对照组比较,淋巴细胞、中性粒细胞浸润显著减少,急性排斥损伤病理评分降低.实时荧光定量RT-PCR结果显示,与同种同型组相比,同种异型组移植肺中IL-17A和IFN-γmRNA的表达水平升高;抗CD3单抗可降低移植肺中IL-17A与IFN-γmRNA表达水平,升高Fo

作者:梁凡;陈荣卷;李燕燕;丁跃中;许江南

来源:中华胸心血管外科杂志 2019 年 35卷 5期

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作者:
梁凡;陈荣卷;李燕燕;丁跃中;许江南
来源:
中华胸心血管外科杂志 2019 年 35卷 5期
标签:
小鼠原位肺移植 急性排斥 抗CD3单抗 调节性T细胞 Orthotopic lung transplantation Acute rejection Anti-CD3 monoclonal antibodies ( Anti-CD3mAbs) Regulatory T( Treg) cells
目的 建立小鼠原位左肺移植模型,探究抗CD3单抗缓解肺移植急性排斥损伤的作用机制,为其在临床肺移植的应用提供理论依据.方法 选取SPF级野生型BALB/c和C57BL/6小鼠,构建原位左肺移植模型,设置同种同型对照组(C57BL/6→C57BL/6,6只)、同种异型对照组(BALB/c→C57BL/6,6只),同种异型单抗处理组(BALB/c→C57BL/6,4只).术后第2~6天及第9天每日腹腔注射50 g抗CD3单抗.采用苏木精-伊红、马松染色以及CD3/髓过氧化物酶(MPO)免疫组化染色,观察各组移植肺T淋巴细胞和中性粒细胞浸润分布情况,进行急性排斥病理评分;实时荧光定量RT-PCR检测移植肺组织转录因子FoxP3和细胞因子IL-17A、IFN-γ的mRNA表达水平;流式细胞术检测受体小鼠脾脏中FoxP3+调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比例.结果 移植术后10天,同种同型组移植肺外观呈淡红色,柔软有弹性,病理学检测未见明显的炎症细胞浸润和组织损伤;同种异型对照组移植肺外观呈绛紫色,硬度增加;同种异型单抗处理组外观淡红柔软,与同种异型对照组比较,淋巴细胞、中性粒细胞浸润显著减少,急性排斥损伤病理评分降低.实时荧光定量RT-PCR结果显示,与同种同型组相比,同种异型组移植肺中IL-17A和IFN-γmRNA的表达水平升高;抗CD3单抗可降低移植肺中IL-17A与IFN-γmRNA表达水平,升高Fo