目的应用电脉冲介导的重组人血小板生成素(thTpo)基因的体内转移，探讨其对正常及实验性血小板减少小鼠的促血小板生成作用。方法应用基因重组技术，构建真核细胞高表达质粒pcDI/Tpo，将200μgpcDI/Tpo质粒注入正常及实验性血小板减少小鼠的股四头肌内，随后给予100V、1Hz、40ms电刺激6次，用RT-PCR及Western blot方法观察rhTpo基因在正常小鼠骨骼肌内的表达，ELISA法测定小鼠血浆Tpo水平。用细胞计数板计数小鼠外周血血小板。结果成功构建了真核细胞高表达质粒pcDI/Tpo。将pcDI/Tpo转染小鼠后，在小鼠的骨骼肌内有rhTpomRNA及蛋白的表达，血浆Tpo水平由(250±76)ng/L升高至(1185±264)ng/L。正常小鼠的外周血血小板由(259±27)×109/L最高升高至(640±31)×109/L；注射卡铂后，转pcDI/Tpo组小鼠的血小板最低下降至(138±24)×109/L，比转pcⅨ空载体组[(98±19)×109/L]和单纯注射卡铂组[(92±16)×109/L]最低值高，同时血小板恢复时间提前，第14天已恢复至(238±26)×109/L。结论应用电脉冲介导的基因转移方法，可使小Tpo基因在小鼠骨骼肌内有效地表达，并发挥其促血小板生成的作用。
作者：臧维苹；魏旭东；王申五；王德炳
来源：中华血液学杂志 2001 年 22卷 3期
