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目的探讨人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)的体外分离、纯化、扩增和向神经元样细胞的定向诱导分化条件.方法无菌条件下采集正常人脐血,肝素抗凝,用相对密度为1.077的淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,进而获得MSC.用MesencultTM培养基进行纯化和扩增培养.用流式细胞仪检测MSC的表面标志.取扩增2,5,8代的MSC分别向神经元样细胞诱导,免疫组化和组化法检测神经元样细胞特异性标志和结构.结果脐血MSC每扩增一代,细胞数量增加约2~3倍.6.6×105个人脐血原代MSC在体外扩增10代后获得9.9×108个细胞,扩增约1.5×103倍.流式细胞仪检测结果显示,脐血MSC不表达CD34、CD11a和CD11b,强表达CD29,弱表达CD71,与骨髓MSC表面抗原特性一致.诱导后的细胞平均有70

作者:侯玲玲;曹华;魏国荣;白慈贤;张涌;吴祖泽;裴雪涛

来源:中华血液学杂志 2002 年 23卷 8期

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作者:
侯玲玲;曹华;魏国荣;白慈贤;张涌;吴祖泽;裴雪涛
来源:
中华血液学杂志 2002 年 23卷 8期
标签:
胎血 间充质干细胞 体外扩增 诱导分化 神经元样细胞
目的探讨人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)的体外分离、纯化、扩增和向神经元样细胞的定向诱导分化条件.方法无菌条件下采集正常人脐血,肝素抗凝,用相对密度为1.077的淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞,进而获得MSC.用MesencultTM培养基进行纯化和扩增培养.用流式细胞仪检测MSC的表面标志.取扩增2,5,8代的MSC分别向神经元样细胞诱导,免疫组化和组化法检测神经元样细胞特异性标志和结构.结果脐血MSC每扩增一代,细胞数量增加约2~3倍.6.6×105个人脐血原代MSC在体外扩增10代后获得9.9×108个细胞,扩增约1.5×103倍.流式细胞仪检测结果显示,脐血MSC不表达CD34、CD11a和CD11b,强表达CD29,弱表达CD71,与骨髓MSC表面抗原特性一致.诱导后的细胞平均有70