目的分析人骨髓基质细胞(BMSC)CD40分子及其配体(CD40L)的表达,观察BMSC经CD40激发型单抗(5C11)激发后,其培养上清中IL-3、IL-6、Flt3配体(FL)和干细胞因子(SCF)含量变化及对纯化脐血CD34+细胞的作用.方法新鲜分离人骨髓单个核细胞,经体外培养获得BMSC.间接免疫荧光标记,流式细胞仪分析细胞表面CD40和CD40L的表达,并与5C11(20μg/ml)共同孵育,分别于24,48和72 h取上清液,ELISA法测定IL-3、IL-6、FL和SCF含量;在与5C11共同培养24h后,收取培养上清,与纯化的脐血CD34+细胞共同孵育,1周后进行细胞计数、细胞集落培养,并用钙磷脂结合蛋白(Annexin Ⅴ)标记,流式细胞仪分析细胞凋亡.结果发现BMSC表达CD40分子,经5C11激发后,BMSC IL-6和FL分泌增加,而对IL-3及SCF含量无影响;BMSC经5C11激发培养后支持脐血CD34+细胞的增殖,培养7d后其细胞数和集落数显著多于对照组,且细胞凋亡率低,二者差异有显著性(P<0.01).结论 BMSC CD40分子配基化可促进IL-6和FL的分泌,并支持CD34+细胞的增殖,CD40/CD40L可能通过调节细胞因子的释放参与造血调控.
作者：傅晋翔；刘艳；张学光
来源：中华血液学杂志 2002 年 23卷 11期
