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目的探讨髓系白血病-1(Mcl-1)基因在HL-60细胞对全反式维甲酸(ATRA)耐药中的作用.方法采用少量、递增、反复ATRA诱导HL-60细胞,建立ATRA耐药细胞系HL-60/ATRA;利用鸡尾酒法制备Mcl-1基因的小片段干扰RNA(Small interference RNA,siRNA),并通过脂质体介导将其导入HL-60/ATRA细胞;Western blot检测Mcl-1蛋白在细胞中的表达;MTT实验、NBT还原反应实验、TUNEL免疫组化染色法分别检测细胞的增殖、分化和凋亡情况.结果HL-60/ATRA细胞Mcl-1蛋白相对灰度值为0.624±0.127,较野生型HL-60细胞(相对灰度值为0.162±0.127)明显高表达,并可耐受100 nmo/L的ATRA,而不发生分化、凋亡[凋亡率为(1.0±0.5)

作者:付劲蓉;刘文励;周剑锋;孙汉英;郑邈;黄梅;李春蕊;冉丹;罗莉

来源:中华血液学杂志 2005 年 26卷 6期

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作者:
付劲蓉;刘文励;周剑锋;孙汉英;郑邈;黄梅;李春蕊;冉丹;罗莉
来源:
中华血液学杂志 2005 年 26卷 6期
标签:
基因,Mcl-1 RNA干扰 维甲酸 抗药性,多药 细胞系,HL-60
目的探讨髓系白血病-1(Mcl-1)基因在HL-60细胞对全反式维甲酸(ATRA)耐药中的作用.方法采用少量、递增、反复ATRA诱导HL-60细胞,建立ATRA耐药细胞系HL-60/ATRA;利用鸡尾酒法制备Mcl-1基因的小片段干扰RNA(Small interference RNA,siRNA),并通过脂质体介导将其导入HL-60/ATRA细胞;Western blot检测Mcl-1蛋白在细胞中的表达;MTT实验、NBT还原反应实验、TUNEL免疫组化染色法分别检测细胞的增殖、分化和凋亡情况.结果HL-60/ATRA细胞Mcl-1蛋白相对灰度值为0.624±0.127,较野生型HL-60细胞(相对灰度值为0.162±0.127)明显高表达,并可耐受100 nmo/L的ATRA,而不发生分化、凋亡[凋亡率为(1.0±0.5)