目的 研究基质金属蛋白酶家族(TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2)的表达对急性单核细胞白血病细胞体外侵袭力的影响.方法 以急性单核细胞白血病细胞株SHI-1细胞为研究对象,用定量PCR、Western blot法分别检测TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2 mRNA和蛋白表达,并以NB4、K562、THP-1等人类其他白血病细胞株细胞为对照,进行比较.构建TIMP-2逆转录病毒载体,转染SHI-1细胞,G418筛选,有限稀释法挑选出单克隆S1、S2、S3细胞.RNA干扰(RNAi)法干扰SHI-1细胞TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2表达.明胶酶谱法测定不同细胞和骨髓基质细胞(BMSC)共培养24 h后上清中MMP-2的表达,细胞侵袭实验测定SHI-1细胞侵袭人工基质膜的能力.结果 SHI-1细胞的TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2 mRNA表达和蛋白表达均显著高于其他细胞(P＜0.05).SHI-1细胞和BMSC共培养上清中的MMP-2酶原和活化的MMP-2含量及细胞体外侵袭率均高于其他细胞(P＜0.05).单克隆S1、S2、S3细胞TIMP-2 mRNA表达水平分别是SHI-1细胞的3.0倍、2.0倍和1.5倍(P＜0.05),蛋白表达水平分别上调2.6倍、1.5倍和1.3倍(P＜0.01),体外侵袭率增加1.5～2.5倍(P＜0.05),活化的MMP-2含量增加1.5～3.0倍(P＜0.01).RNA干扰基因沉默效率为85
作者：王春玲；陈子兴；李振江；岑建农
来源：中华血液学杂志 2010 年 31卷 12期
