目的 探讨WT1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)发病机制中的作用.方法 采用RT-PCR法检测CD59及CD59-骨髓单个核细胞(BMMNC)WT1 mRNA的表达水平;利用RNA干扰(RNAi)技术敲低WT1基因,采用流式细胞术检测WT1基因敲低前后BMMNC细胞周期及凋亡率.结果 PNH患者CD59细胞组、CD59+细胞组及正常对照组WT1 mRNA的相对表达量分别为1.06±0.12、0.90±0.12和0.86±0.05,CD59细胞组明显高于CD59+细胞组和正常对照组(P值均<0.05),而CD59+细胞组和正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).PNH患者WT1 mRNA的相对表达量与CD59细胞数量呈正相关(r2=0.490,P=0.016),而与CD59+细胞数量无明显相关性.PNH患者骨髓CD59细胞转染靶向WT1基因小干扰RNA(siRNA)后,WT1 mRNA表达水平下降;PNH患者空白对照组和转染无义序列组(siRNA-scr转染组)G0/G1期细胞比例分别为(92.73±3.71)%和(93.06±4.14)%,S期分别为(6.99±3.61)%和(6.73±4.08)%;siRNA-WT1转染组G0/G1期细胞比例为(94.46±3.71)%,S期为(5.40±3.55)%,与空白对照组和siRNA-scr转染组比较差异均有统计学意义(P<0.05).siRNA-WT1转染组细胞凋亡率[(35.91±22.36)%]较空白对照组[(27.39±18.99)%]和siRNA-scr转染组[(26.12±17.10)%]明显增加(P<0.05).结
作者:张媛媛;付蓉;王一浩;李丽娟;刘惠;刘春燕;张田;丁少雪;李丽燕
来源:中华血液学杂志 2014 年 35卷 7期