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目的 探讨低氧诱导因子-2α(HIF-2α)对高原红细胞增多症(HAPC)模型大鼠骨髓CD71+细胞红系特异性转录因子GATA-1表达的影响.方法 选用雄性SD大鼠48只,随机分为低海拔对照组(海拔2 250m饲养)和HAPC模型组(海拔4 300m饲养).在海拔4 300m自然环境下复制HAPC大鼠模型并采用骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清红细胞生成素(EPO)检测进行验证.应用密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合的方法分选大鼠骨髓CD71+细胞,Q-PCR和Western blot法检测其HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达.低氧培养CD71+细胞,以最佳干扰序列HIF-2α shRNAi3转染96 h,Q-PCR和Western blot检测HIF-2α 、GATA-1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清EPO含量测定结果提示HAPC大鼠模型复制成功.HAPC模型组骨髓CD71+细胞HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达高于低海拔对照组,且HIF-2α与GATA-1在mRNA和蛋白表达均呈正相关(r=0.923,P<0.01;r=0.838,P<0.01).HIF-2α shRNAi3干扰HAPC模型组骨髓CD71+细胞96 h后,HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达均低于空白对照组和阴性对照组.结论 HIF-2α对GATA-1表达的影响可能与HAPC的发生发展相关.

作者:刘芳;魏巍;丁谨;陈英;冯婷婷;冀林华;施继禹

来源:中华血液学杂志 2016 年 37卷 8期

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作者:
刘芳;魏巍;丁谨;陈英;冯婷婷;冀林华;施继禹
来源:
中华血液学杂志 2016 年 37卷 8期
标签:
高原红细胞增多症 低氧诱导因子-2 alpha GATA-1 小干扰RNA High altitude polycythemia Hypoxia-inducible factor-2 αlpha GATA-1 Small interfering RNA
目的 探讨低氧诱导因子-2α(HIF-2α)对高原红细胞增多症(HAPC)模型大鼠骨髓CD71+细胞红系特异性转录因子GATA-1表达的影响.方法 选用雄性SD大鼠48只,随机分为低海拔对照组(海拔2 250m饲养)和HAPC模型组(海拔4 300m饲养).在海拔4 300m自然环境下复制HAPC大鼠模型并采用骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清红细胞生成素(EPO)检测进行验证.应用密度梯度离心和免疫磁珠分选相结合的方法分选大鼠骨髓CD71+细胞,Q-PCR和Western blot法检测其HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达.低氧培养CD71+细胞,以最佳干扰序列HIF-2α shRNAi3转染96 h,Q-PCR和Western blot检测HIF-2α 、GATA-1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 骨髓细胞分类计数、血液学参数和血清EPO含量测定结果提示HAPC大鼠模型复制成功.HAPC模型组骨髓CD71+细胞HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达高于低海拔对照组,且HIF-2α与GATA-1在mRNA和蛋白表达均呈正相关(r=0.923,P<0.01;r=0.838,P<0.01).HIF-2α shRNAi3干扰HAPC模型组骨髓CD71+细胞96 h后,HIF-2α、GATA-1 mRNA和蛋白的表达均低于空白对照组和阴性对照组.结论 HIF-2α对GATA-1表达的影响可能与HAPC的发生发展相关.