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目的观察人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞体外培养时的形态及相关细胞骨架蛋白变化规律,进而研究人玻璃体液对RPE细胞形态及细胞骨架蛋白表达的影响,探讨玻璃体液在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)中的调控作用. 方法行人RPE细胞原代培养并传代扩增,采用Western blot法,分别检测角蛋白18(cytokeratin 18, CK18)、平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在第2、5、8代细胞中的表达情况.用1∶4玻璃体液培养RPE细胞6 d后,观察细胞形态及超微结构改变,采用免疫细胞化学及Western blot法,检测CK18、α-SMA表达变化. 结果人RPE细胞在体外培养时,会逐渐丧失上皮样形态,向成纤维样转变,CK18在2代表达量中等,5代最高,而在8代明显下降,而α-SMA逐渐升高.与对照组相比,人玻璃体液促进RPE细胞在形态上向成纤维样细胞转变.同时细胞内CK18表达低于对照组,差异具有显著性的意义(P<0.05);α-SMA表达高于对照组,差异具有显著性的意义(P<0.01). 结论人RPE细胞在玻璃体液与血清的作用下向具有收缩性能的间质细胞转变,同时细胞移行能力可能发生改变,结果提示玻璃体液可能促进RPE细胞参与的PVR的发展.

作者:刘勇;王一;阴正勤;祝枚东

来源:中华眼底病杂志 2002 年 18卷 4期

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作者:
刘勇;王一;阴正勤;祝枚东
来源:
中华眼底病杂志 2002 年 18卷 4期
标签:
玻璃体 色素上皮,眼/生理学 免疫组织化学 蛋白质/分析 细胞培养
目的观察人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞体外培养时的形态及相关细胞骨架蛋白变化规律,进而研究人玻璃体液对RPE细胞形态及细胞骨架蛋白表达的影响,探讨玻璃体液在增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)中的调控作用. 方法行人RPE细胞原代培养并传代扩增,采用Western blot法,分别检测角蛋白18(cytokeratin 18, CK18)、平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在第2、5、8代细胞中的表达情况.用1∶4玻璃体液培养RPE细胞6 d后,观察细胞形态及超微结构改变,采用免疫细胞化学及Western blot法,检测CK18、α-SMA表达变化. 结果人RPE细胞在体外培养时,会逐渐丧失上皮样形态,向成纤维样转变,CK18在2代表达量中等,5代最高,而在8代明显下降,而α-SMA逐渐升高.与对照组相比,人玻璃体液促进RPE细胞在形态上向成纤维样细胞转变.同时细胞内CK18表达低于对照组,差异具有显著性的意义(P<0.05);α-SMA表达高于对照组,差异具有显著性的意义(P<0.01). 结论人RPE细胞在玻璃体液与血清的作用下向具有收缩性能的间质细胞转变,同时细胞移行能力可能发生改变,结果提示玻璃体液可能促进RPE细胞参与的PVR的发展.