目的:观察敲低热休克蛋白B8 (HspB8)对鼠视神经钳夹(ONC)后视网膜神经节细胞(RGC)及视网膜功能的影响。方法:构建敲低HspB8的重组腺相关病毒(AAV) 2-小发夹HspB8 (shHspB8)-绿色荧光蛋白(GFP)。雄性C57BL/6J小鼠66只随机分为正常对照组、ONC组、AAV2-shHspB8组、ONC+AAV2-shHspB8组、ONC+AAV2组,分别为10、20、16、10、10只,双眼均作为实验眼。建模后3、7 d,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测小鼠视网膜HspB8蛋白相对表达变化;GFP免疫荧光染色确定AAV2-shHspB8-GFP转染情况。建模后5 d,视动反应(OMR)、暗适应全视野闪光视网膜电图(ff-ERG)检测各组小鼠视敏度、振荡电位(OPs )、明视负向反应(PhNR)振幅和潜伏期;视网膜铺片计数各组小鼠RGC。采用Mann-Whitney
U检验、独立样本
t检验、Welch法校正
t检验、单因素方差分析、Bonferroni
t检验对数据进行统计分析。
结果:与正常对照组比较,ONC3组小鼠视网膜中HspB8蛋白相对表达量明显增加,差异有统计学意义(
F=43.63,
P<0.01 )。与正常对照组比较,ONC5组小鼠视敏度明显降低,差异有统计学意义(
P<0.01);a波、b波、OPs、PhNR振幅下降,b波潜伏期延长,差异均有统计学
作者:谢斐葭;贺涛;杨宁;杨家翼;花蒂豪;罗晋媛;李宗媛;邢怡桥
来源:中华眼底病杂志 2021 年 37卷 4期