目的 分析和验证N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的视网膜兴奋性毒性大鼠模型中经5-甲基胞嘧啶(m5C)甲基化修饰的转录本的差异性表达.方法 7~8周龄雄性Sprague Dawley大鼠65只,随机分为正常对照组、NMDA组.NMDA组大鼠右眼(模型眼)玻璃体腔注射浓度为50.0 mmol/L的NMDA 3μl,正常对照组大鼠右眼玻璃体腔注射等体积生理盐水.建模后7d,采用视觉诱发电位检测大鼠视神经传导功能;苏木精-伊红染色观察大鼠视网膜整体结构,检测视网膜各层厚度以及视网膜神经节细胞层的细胞数量;视网膜铺片免疫荧光染色检测β3微管蛋白免疫荧光染色阳性细胞个数.收集正常对照组、NMDA组大鼠视网膜,提取总RNA,进行高通量m5C修饰RNA测序,并进行生物信息学分析;实时定量聚合酶链反应检测视网膜中SLFN3、PLXNB3、CD36、HIC2 mRNA相对表达量.组间比较行非配对t检验.结果 正常对照组、NMDA组P1波潜伏期分别为(117.86±6.48)、(148.46±3.78)ms,振幅分别为(42.57±2.41)、(8.68±0.63)pV;与正常对照组比较,NMDA组潜伏期延长,振幅显著下降,差异均有统计学意义(P<0.001).正常对照组大鼠视网膜神经节细胞(RGC)排列均匀,细胞核大而圆;NMDA组大鼠视网膜RGC体积萎缩,数量减少,细胞核固缩.正常对照组、NMDA组视网膜总厚度分别为(207.51±12.76)、
作者:王森楠;李亚红;刘勋;张琰
来源:中华眼底病杂志 2023 年 39卷 10期