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目的 建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的副溶血弧菌快速检测方法.方法 针对副溶血弧菌toxR基因序列设计一套LAMP引物,应用LAMP技术对33株副溶血弧菌、22株其他种属细菌及含不同副溶血弧菌参考菌株( ATCC 17802)基因组拷贝数(5×100 ~5×105拷贝/μl)的样品进行检测,对平行样品分别应用普通PCR法和TaqMan探针实时PCR法进行检测,对3种检测方法的特异度、灵敏度及检测下限及反应时间进行比较.结果 LAMP技术、普通PCR法、TaqMan探针实时PCR法检测副溶血弧菌的特异度、灵敏度均为100%(分别为22/22,33/33),检测下限分别为5×101、5×103、5×102拷贝/μl,反应所需时长分别为22 main、3h、50 min.结论 与普通PCR、TaqMan 探针实时PCR检测相比,LAMP技术检测下限低,检测时长短,适于对副溶血弧菌进行快速检测.

作者:卢昕;王淑京;刘莎;阚飙;逄波

来源:中华预防医学杂志 2012 年 46卷 5期

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作者:
卢昕;王淑京;刘莎;阚飙;逄波
来源:
中华预防医学杂志 2012 年 46卷 5期
标签:
弧菌 副溶血性 核酸扩增技术 环介导等温扩增 toxR基因 Vibrio parahaemolyticus Nucleic acid amplification techniques Loop-mediated isothermal amplification toxR gene
目的 建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的副溶血弧菌快速检测方法.方法 针对副溶血弧菌toxR基因序列设计一套LAMP引物,应用LAMP技术对33株副溶血弧菌、22株其他种属细菌及含不同副溶血弧菌参考菌株( ATCC 17802)基因组拷贝数(5×100 ~5×105拷贝/μl)的样品进行检测,对平行样品分别应用普通PCR法和TaqMan探针实时PCR法进行检测,对3种检测方法的特异度、灵敏度及检测下限及反应时间进行比较.结果 LAMP技术、普通PCR法、TaqMan探针实时PCR法检测副溶血弧菌的特异度、灵敏度均为100%(分别为22/22,33/33),检测下限分别为5×101、5×103、5×102拷贝/μl,反应所需时长分别为22 main、3h、50 min.结论 与普通PCR、TaqMan 探针实时PCR检测相比,LAMP技术检测下限低,检测时长短,适于对副溶血弧菌进行快速检测.