目的 应用多重实时荧光PCR技术对北京地区有免疫史麻疹患者临床样本进行核酸检测,鉴别麻疹野病毒和疫苗病毒.方法 于2011年7月至2012年2月在北京采集16例8~9月龄初免后疑似麻疹患者的10份咽拭子和15份尿液标本.先用麻疹疫苗病毒、野病毒和其他呼吸道病毒检测多重实时荧光PCR方法的特异性,后对麻疹疫苗株和野病毒滴定后稀释,检测方法的敏感性,并与PCR-RFLP法比较.同时,检测麻疹患者的临床样本,并测序确认.结果 Fam、Joe及Cy5检测通道引物与探针对麻疹病毒有很好的检测特异性,对疫苗病毒和野病毒有很好的区分效果.此方法检测麻疹疫苗病毒的灵敏度达到0.1 CCID50/0.1 ml;检测麻疹野病毒的灵敏度可达0.006 CCID50/0.1 ml,敏感性高于PCR-RFLP法.16例接种过首剂麻疹疫苗的麻疹患者中,3例阴性,其余13例均为麻疹病毒A基因型,经测序验证均为疫苗株.结论 多重实时荧光PCR鉴别麻疹疫苗株和野毒株的方法准确、快速、灵敏,可以为筛查麻疹患者、鉴定疫苗相关病例提供帮助.
作者:陈萌;黄芳;陈维欣;董梅;张铁钢;吴疆
来源:中华预防医学杂志 2012 年 46卷 10期