目的 将环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法应用于食品中单核细胞增生李斯特菌的检验,并在检测方法特异性、灵敏度等方面与实时荧光PCR和传统方法进行比较.方法 针对单核细胞增生李斯特菌hly溶血素基因设计LAMP引物,应用LAMP方法对88株单核细胞增生李斯特菌、1株单核细胞增生李斯特菌参考菌株ATCC 15313、33株非目标菌进行检测；并进行食品基质添加实验及对样品进行检测,同时应用实时荧光PCR方法和ISO 11290-1方法进行平行检测.对3种检测方法的特异性、灵敏度、检测低限及实际样品检验的结果进行比较.结果 LAMP和荧光PCR对89株单核细胞增生李斯特菌的检验结果均为阳性(100％,89/89),33株非目标菌的检测结果均为阴性(100％,33/33).LAMP方法的检测灵敏度为2×102 CFU/ml,与实时荧光PCR方法(2×102 CFU/ml)相同,且优于ISO 11290-1方法(2×104 CFU/ml).食品基质添加实验结果显示,3种检测方法的检测低限均为3 CFU/25 g样品.实际食品样品检测结果显示,3种方法单核细胞增生李斯特菌的检出率均为4％(2/45).结论 本研究建立的单核细胞增生李斯特菌LAMP检测方法具有良好的特异性,检测灵敏度与实时荧光PCR相当,适用于单核细胞增生李斯特菌的快速筛选.
作者：张蕾；曾静；马丹；程晋霞；张海予
来源：中华预防医学杂志 2014 年 48卷 3期
