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目的 探讨CCM3基因缺陷对醋酸铅所致小鼠胚胎成纤维细胞遗传毒性的影响.方法 将C57雌鼠与CCM3基因敲除小鼠杂合雄鼠合笼后,取孕13.5 d的胎鼠,原代分离培养胚胎成纤维细胞.基因分型后,野生型和CCM3基因缺陷型细胞分别给予6.25、12.50、25.00、50.00、100.00、200.00 μmol/L醋酸铅处理,用MTS法检测细胞活性,并根据实验结果,选择6.25、25.00、100.00 μmol/L醋酸铅染毒,用双核阻滞法检测遗传毒性,用Western blot法检测相关基因的蛋白表达情况.结果 小鼠胚胎成纤维细胞经醋酸铅处理24 h后,野生型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(69.16±1.36)与对照组(100.00±2.33)相比,细胞活性下降了30%,杂合型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(87.16±5.50)与对照组(100±2.06)相比,细胞活性下降了13%,差异有统计学意义(F野生型=98.59,F杂合型=82.63,P值均<0.001).经醋酸铅处理48 h后,野生型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(51.99±5.62)与对照组(100.00±3.11)相比,细胞活性下降了50%,杂合型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(66.33±4.06)与对照组(100.00±5.72)相比,细胞活性下降了35%,差异均有统计学意义(F野生型=82.63,F杂合型=36.86,P值均<0.001).双核微核实验结果显示,随着染毒剂量增加,两种基因型细胞的核分

作者:苏晓琳;邢秀梅;赖关朝;孙易;赵志强;陈静莉;申碧羚;刘新霞;何云

来源:中华预防医学杂志 2015 年 49卷 3期

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苏晓琳;邢秀梅;赖关朝;孙易;赵志强;陈静莉;申碧羚;刘新霞;何云
来源:
中华预防医学杂志 2015 年 49卷 3期
标签:
铅 小鼠 CCM3基因 胚胎成纤维细胞 细胞毒性 Lead Mice CCM3 gene Embryonic fibroblasts Cell toxicity
目的 探讨CCM3基因缺陷对醋酸铅所致小鼠胚胎成纤维细胞遗传毒性的影响.方法 将C57雌鼠与CCM3基因敲除小鼠杂合雄鼠合笼后,取孕13.5 d的胎鼠,原代分离培养胚胎成纤维细胞.基因分型后,野生型和CCM3基因缺陷型细胞分别给予6.25、12.50、25.00、50.00、100.00、200.00 μmol/L醋酸铅处理,用MTS法检测细胞活性,并根据实验结果,选择6.25、25.00、100.00 μmol/L醋酸铅染毒,用双核阻滞法检测遗传毒性,用Western blot法检测相关基因的蛋白表达情况.结果 小鼠胚胎成纤维细胞经醋酸铅处理24 h后,野生型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(69.16±1.36)与对照组(100.00±2.33)相比,细胞活性下降了30%,杂合型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(87.16±5.50)与对照组(100±2.06)相比,细胞活性下降了13%,差异有统计学意义(F野生型=98.59,F杂合型=82.63,P值均<0.001).经醋酸铅处理48 h后,野生型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(51.99±5.62)与对照组(100.00±3.11)相比,细胞活性下降了50%,杂合型细胞100.00 μmol/L醋酸铅处理组(66.33±4.06)与对照组(100.00±5.72)相比,细胞活性下降了35%,差异均有统计学意义(F野生型=82.63,F杂合型=36.86,P值均<0.001).双核微核实验结果显示,随着染毒剂量增加,两种基因型细胞的核分