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目的 探讨神经营养素-4(NT4)-神经短肽(NAP)对兔虹膜色素上皮细胞(IPECs)的保护作用. 方法分离培养兔IPECs,采用非对称互补引物/模板方法构建神经短肽NAP和神经营养因子NT4的融合基因,构建重组腺相关病毒 (rAAV) -绿色荧光蛋白(GFP)和rAAV-NAP,并以此转染体外培养的兔IPECs,以荧光表达来检测病毒的转染情况.对体外培养的兔IPECs进行紫外线光损伤,并用MTT法和流式细胞仪来检测NAP对兔IPECs的保护作用.结果 转染了rAAV-GFP的兔IPECs表达了明显的GFP荧光.与对照细胞相比,转染了rAAV-NAP的兔IPECs经紫外线光损伤后,细胞的增殖正常,细胞凋亡率降低. 结论本研究所构建的rAAV-NAP可有效地转染体外培养的兔IPECs,NAP对兔IPECs有光保护作用.(中华眼科杂志,2006,42:1008-1012)

作者:佘华宁;孙乃学;郑玉萍;权彦龙;曹振平;王肖华

来源:中华眼科杂志 2006 年 42卷 11期

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作者:
佘华宁;孙乃学;郑玉萍;权彦龙;曹振平;王肖华
来源:
中华眼科杂志 2006 年 42卷 11期
标签:
寡肽类 基因融合 色素上皮,眼 转染
目的 探讨神经营养素-4(NT4)-神经短肽(NAP)对兔虹膜色素上皮细胞(IPECs)的保护作用. 方法分离培养兔IPECs,采用非对称互补引物/模板方法构建神经短肽NAP和神经营养因子NT4的融合基因,构建重组腺相关病毒 (rAAV) -绿色荧光蛋白(GFP)和rAAV-NAP,并以此转染体外培养的兔IPECs,以荧光表达来检测病毒的转染情况.对体外培养的兔IPECs进行紫外线光损伤,并用MTT法和流式细胞仪来检测NAP对兔IPECs的保护作用.结果 转染了rAAV-GFP的兔IPECs表达了明显的GFP荧光.与对照细胞相比,转染了rAAV-NAP的兔IPECs经紫外线光损伤后,细胞的增殖正常,细胞凋亡率降低. 结论本研究所构建的rAAV-NAP可有效地转染体外培养的兔IPECs,NAP对兔IPECs有光保护作用.(中华眼科杂志,2006,42:1008-1012)