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目的 研究内质网应激介导凋亡途径的标志物生长停滞及DNA损伤基因153(GADD153)在大鼠实验性视网膜脱离后不同时期的基因与蛋白表达水平并探讨内质网应激与视网膜脱离后细胞凋亡发生的关系.方法 对照实验研究.Wistar大鼠88只(88只眼),采用计算机随机数字表法,分为正常对照组和实验组,实验组包括视网膜脱离后1/2、1、2、4、8、16及32 d组;每组各11只鼠(11只眼),通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法,建立视网膜脱离模型.在视网膜脱离后1/2、1、2,4、8、16及32 d分别摘除眼球.应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),检测视网膜细胞凋亡情况;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测GADD153 mRNA的表达水平;应用免疫印迹法,检测视网膜组织中GADD153蛋白表达水平;采用免疫荧光和激光共焦显微镜技术,观察GADD153蛋白在视网膜各层细胞的分布.应用SPSS 10.0统计学软件进行数据分析.对各组鼠视网膜凋亡细胞百分比和GADD153 mRNA表达水平的比较,采用Kruskal Wallis 检验;GADD153蛋白表达水平的比较,采用One-Way ANOVA检验,以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 大鼠视网膜脱离后凋亡细胞主要集中在光感受器细胞层,凋亡高峰出现在视网膜脱离后2~4 d,8 d后显著减少,组间视网膜细胞凋亡百分比

作者:刘海洋;钱锦;汪枫桦;许迅;张皙;张娴;李甦雁;张正培;孙晓东

来源:中华眼科杂志 2008 年 44卷 9期

知识库介绍

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作者:
刘海洋;钱锦;汪枫桦;许迅;张皙;张娴;李甦雁;张正培;孙晓东
来源:
中华眼科杂志 2008 年 44卷 9期
标签:
视网膜脱离 内质网 细胞凋亡 光感受器 转录因子CHOP Retinal detachment Endoplasmic reticulum Apoptosis Photoreceptor Transcription factor CHOP
目的 研究内质网应激介导凋亡途径的标志物生长停滞及DNA损伤基因153(GADD153)在大鼠实验性视网膜脱离后不同时期的基因与蛋白表达水平并探讨内质网应激与视网膜脱离后细胞凋亡发生的关系.方法 对照实验研究.Wistar大鼠88只(88只眼),采用计算机随机数字表法,分为正常对照组和实验组,实验组包括视网膜脱离后1/2、1、2、4、8、16及32 d组;每组各11只鼠(11只眼),通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法,建立视网膜脱离模型.在视网膜脱离后1/2、1、2,4、8、16及32 d分别摘除眼球.应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),检测视网膜细胞凋亡情况;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测GADD153 mRNA的表达水平;应用免疫印迹法,检测视网膜组织中GADD153蛋白表达水平;采用免疫荧光和激光共焦显微镜技术,观察GADD153蛋白在视网膜各层细胞的分布.应用SPSS 10.0统计学软件进行数据分析.对各组鼠视网膜凋亡细胞百分比和GADD153 mRNA表达水平的比较,采用Kruskal Wallis 检验;GADD153蛋白表达水平的比较,采用One-Way ANOVA检验,以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 大鼠视网膜脱离后凋亡细胞主要集中在光感受器细胞层,凋亡高峰出现在视网膜脱离后2~4 d,8 d后显著减少,组间视网膜细胞凋亡百分比