目的 探讨外源性白细胞介素(IL)-2和IL-23对小鼠类结合蛋白(IRBP)特异性T细胞向辅助性T细胞(Th)1、Th17分化的诱导及致病性的研究.方法 实验研究.向30只雌性C57BL/6小鼠(6～8周)皮下注射200 μl含200μg人IRBP 1～20和0.8 mg结核分枝杆菌的乳糜液,建立实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)动物模型.在免疫后第13天取出小鼠脾脏和引流淋巴结,预留部分脾脏通过逆转录(RT)-PCR法检测其中干扰素(IFN)-γ mRNA与IL-17 mRNA的表达水平,作为正常对照组.其余脾脏在纱网研磨后用尼龙毛富集的方法提取小鼠T细胞,将其分为IL-2组和IL-23组,均加入抗原递呈细胞和IRBP 1～20,分别加入外源性小鼠重组IL-2与IL-23.在培养后第2天用Ficoll密度梯度离心方法分离T细胞,RT-PCR法检测T细胞中IFN-γmRNA与IL-17 mRNA的表达情况,同时取T细胞上清液用酶联免疫吸附试验检测上清中IFN-γ与IL-17的含量.继续培养到第4天,利用流式细胞仪检测不同干预条件下IL-17+γδ+T细胞的比例.取30只小鼠建立EAU模型后,取出T细胞,按照以上方法建立IL-2组和IL-23组IRBP特异性T细胞.另取6只小鼠随机分为两组,分别腹腔内注射IL-2组与IL-23组的T细胞,剂量为3.5×106个/只.在注射后第3、7、14天通过间接眼底镜观察小鼠的眼部发病情况,在第21天处死小鼠取出小鼠
作者：李洋；崔彦；毕宏生；王影；李娇；王兴荣
来源：中华眼科杂志 2013 年 49卷 3期
