目的探讨抗凋亡基因survivin在细胞转化中的作用机制.方法利用RT-PCR获得survivin编码区序列,双酶切后,将其定向克隆至原核和真核表达载体;生长曲线观察高表达survivin对细胞增殖的影响;软琼脂集落形成实验观察细胞的接触抑制生长能力;Western Blot检测survivin高表达引起的蛋白质分子改变.结果通过分子克隆,构建survivin原核和真核表达载体,并可在大肠杆菌和真核细胞中表达.生长曲线表明,转染survivin的293细胞的增殖速度略快于对照细胞,尤其在细胞生长至高密度时;Survivin可以明显提高293细胞的软琼脂集落形成能力;Survivin的高表达可以引起癌基因cyclin D1和c-myc的蛋白表达水平增高.结论抗凋亡基因survivin具有促进细胞转化的作用,这种作用可能依赖于cyclin D1和c-myc的功能.
作者:朱红霞;刘爽;周翠琦;周晓波;张帆;全兰平;徐宁志
来源:中华医学杂志 2002 年 82卷 5期