目的研究组蛋白乙酰化对Colo-320和SW1116人结肠癌细胞系p21WAF1和p16INK4A基因表达的影响.方法培养人结肠癌细胞系SW1116和Colo-320,分别以去甲基化制剂5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)和/或组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素(TSA)及丁酸钠(NaBu)干预细胞.运用流式细胞术检测细胞周期变化;以定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究控制细胞周期的基因p21WAF1和p16INK4A的表达;染色质免疫沉淀技术分析基因相关染色质乙酰化组蛋白的水平.结果 TSA或NaBu使人结肠癌细胞阻滞于G1期,而5-aza-dC并不能改变细胞周期.正常情况下,SW1116和Colo-320细胞中均有较弱的p16INK4A表达;两种结肠癌细胞系p21WAF1表达缺如.5-aza-dC干预后,p16INK4A表达增强,相反p21WAF1仍无明显表达.当该两个细胞系经TSA或NaBu处理后,p21WAF1转录水平明显上调,并诱导p21WAF1基因相关染色质乙酰化组蛋白H3和H4的积聚.结论两种人结肠癌细胞系中,HDAC抑制剂通过选择性增加p21WAF1基因相关染色质乙酰化水平,上调p21WAF1基因的转录,并相应地导致结肠癌细胞生长停滞;而p16INK4A基因表达主要受甲基化调节.
作者：陈萦晅；房静远；陆娟；邱德凯
来源：中华医学杂志 2004 年 84卷 4期
