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目的探讨人谷氨酸脱羧酶65(GAD65) DNA疫苗预防非肥胖糖尿病(NOD)小鼠糖尿病的作用机制.方法 (1)62只4周龄NOD雌鼠分为PBS(21只) 、PcDNA(20只)、GAD65(21只)3组,由胫前肌分别注射PBS、质粒PcDNA3.1、人GAD65 DNA疫苗50 μg,1周后重复1次.观察30周龄的累积糖尿病发病率.(2)各组取12周龄未发病NOD鼠(n=10)胰腺HE染色观察胰岛炎;并用末端脱氧核糖核酸缺口标记法(TUNEL)加SABC法检测胰岛β细胞凋亡;ELISA法测定血清、脾细胞培养上清干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)水平; RT-PCR半定量检测脾脏IL-4、IFN-γ和核因子NF-ATc、NF-ATp mRNA表达水平.结果 (1)30周龄时,PBS 、PcDNA、GAD65组发病率分别为95.2

作者:罗建华;周智广;蒋铁建;裴剑浩;李霞;何凌;孙曙光

来源:中华医学杂志 2004 年 21期

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作者:
罗建华;周智广;蒋铁建;裴剑浩;李霞;何凌;孙曙光
来源:
中华医学杂志 2004 年 21期
标签:
糖尿病 小鼠,近交NOD
目的探讨人谷氨酸脱羧酶65(GAD65) DNA疫苗预防非肥胖糖尿病(NOD)小鼠糖尿病的作用机制.方法 (1)62只4周龄NOD雌鼠分为PBS(21只) 、PcDNA(20只)、GAD65(21只)3组,由胫前肌分别注射PBS、质粒PcDNA3.1、人GAD65 DNA疫苗50 μg,1周后重复1次.观察30周龄的累积糖尿病发病率.(2)各组取12周龄未发病NOD鼠(n=10)胰腺HE染色观察胰岛炎;并用末端脱氧核糖核酸缺口标记法(TUNEL)加SABC法检测胰岛β细胞凋亡;ELISA法测定血清、脾细胞培养上清干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)水平; RT-PCR半定量检测脾脏IL-4、IFN-γ和核因子NF-ATc、NF-ATp mRNA表达水平.结果 (1)30周龄时,PBS 、PcDNA、GAD65组发病率分别为95.2