目的研究外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡.方法应用分子克隆技术构建重组质粒pcDNA3.1-PTEN,以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株MDA468,对照组为pcDNA3.1(-)空载体质粒转染组和未转染组.应用RT-PCR、Western印迹法分析目的基因的表达;在表皮生长因子(EGF)的诱导下,采用Western印迹方法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达及细胞在黏附和失黏附状态下的黏着斑激酶的表达;膜联蛋白V-FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.结果 RT-PCR、Western印迹显示pcDNA3.1-PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达,且在EGF的诱导下,p-Akt及p-FAK蛋白表达下调.流式细胞术则显示其凋亡率达21.68
作者：陈庆永；王春友；吴河水；陈道达
来源：中华医学杂志 2005 年 85卷 1期
