目的研究缺氧对人颞下颌关节滑膜成纤维细胞环氧合酶2(COX-2)表达的影响,并探讨其在颞下颌关节紊乱病(TMD)中的生物学作用.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测缺氧不同时间段滑膜成纤维细胞 COX-2基因与蛋白质表达水平.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)以及明胶酶谱法分别测定缺氧组、缺氧与COX-2特异性抑制剂塞来昔布二者联合作用组前列腺素E2(PGE2),金属基质蛋白酶2、9(MMP-2、MMP-9)分泌量的变化,以常氧组为对照.结果 (1)RT-PCR测定细胞缺氧4、8 h COX-2 mRNA分别为1.51±0.34和1.39±0.57,与常氧组0.65±0.24和0.71±0.15比较,差异有统计学意义(均P<0.05).(2)Western印迹测定细胞COX-2蛋白表达,缺氧6 h为0.29±0.06,12 h为0.51±0.09,24 h为0.68±0.11,而常氧组检测不出COX-2蛋白(均P<0.01),表明缺氧条件下,细胞COX-2蛋白表达呈时间依赖性增加.(3)ELISA测定细胞缺氧12 h,释放的PGE2(7.6 ng/ml±0.8 ng/ml)显著高于常氧组(2.5 ng/ml±0.4 ng/ml, P<0.01);联合药物处理组(4.3 ng/ml±0.4 ng/ml)也显著低于缺氧组(P<0.05),表明细胞PGE2释放受抑制.(4)明胶酶谱法测定细胞缺氧12 h,分泌的MMP-2、MMP-9高于常氧组,但在药物联合作用下,分泌能力减弱.结论组织缺氧是导致TMD的一个重要因素;缺
作者:柯金;龙星;刘羽;李健;孟庆功;房维;程勇
来源:中华医学杂志 2005 年 85卷 25期