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目的 检测己糖激酶-Ⅱ基因(HK-Ⅱ)在人结肠癌细胞中的表达,探讨抑制HK-Ⅱ对结肠癌的治疗效应及机制.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测4种人结肠癌细胞HK-Ⅱ基因的表达情况.在HK-Ⅱ抑制剂(3-BrPA)诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞增殖和化疗敏感性变化;用琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA片段;底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-3)活性;流式细胞术和紫外分光光度仪分别检测线粒体膜电位(△ψm)、线粒体膜通透转换孔(PTP)开放的变化.结果 HK-Ⅱ基因在4种人结肠癌细胞中明显表达.抑制HK-Ⅱ(3-BrPA)能明显控制结肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.300 μmol/L 3-BrPA刺激LOVO、HCT-116、HT-29、SW480细胞48 h后,细胞增殖抑制率分别为83.7

作者:彭秋平;梁后杰;周琪;周进明;傅晓岚;钟大平

来源:中华医学杂志 2007 年 87卷 15期

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作者:
彭秋平;梁后杰;周琪;周进明;傅晓岚;钟大平
来源:
中华医学杂志 2007 年 87卷 15期
标签:
结肠直肠肿瘤 糖原酵解 己糖激酶 线粒体 药物疗法
目的 检测己糖激酶-Ⅱ基因(HK-Ⅱ)在人结肠癌细胞中的表达,探讨抑制HK-Ⅱ对结肠癌的治疗效应及机制.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测4种人结肠癌细胞HK-Ⅱ基因的表达情况.在HK-Ⅱ抑制剂(3-BrPA)诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞增殖和化疗敏感性变化;用琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA片段;底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-3)活性;流式细胞术和紫外分光光度仪分别检测线粒体膜电位(△ψm)、线粒体膜通透转换孔(PTP)开放的变化.结果 HK-Ⅱ基因在4种人结肠癌细胞中明显表达.抑制HK-Ⅱ(3-BrPA)能明显控制结肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.300 μmol/L 3-BrPA刺激LOVO、HCT-116、HT-29、SW480细胞48 h后,细胞增殖抑制率分别为83.7