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目的 将多药耐药基因(mdrl)通过逆转录病毒载体导人人胎盘源性间充质干细胞(PMSCs),评价耐药基因导人对P-MSCs干细胞特性的影响.方法 采用胰酶消化法自人足月胎盘组织中分离培养间充质干细胞(MSCs),将含有mdr1基因和绿色荧光蛋白(CFP)报告基因的重组逆转录病毒载体转染P-MSCs;应用流式细胞术检测转染后P-MSCs表型特征,四唑盐比色法和碘化丙啶标记测定其增殖活性和细胞周期,透射电镜下观察转染P-MSCs超微结构变化,条件培养液诱导法分析转染后P-MSCs向脂肪细胞、成骨细胞定向分化能力.结果 转染P-MSCs表达干细胞表面标志,如CD29,CD44和CD73,细胞倍增时间为23.9 h,生长周期仍符合干细胞增殖的特点,超微结构观察转染P-MSCs表面微绒毛增加,细胞内线粒体丰富,粗面内质网轻度扩张,且在特异诱导条件下具有向成脂、成骨定向分化潜能.结论 mdr1基因体外转染人P-MSCs对其干细胞特性无显著影响,这可为P-MSCs在大剂量肿瘤化疗中的应用提供实验参考.

作者:韩丽英;叶明珠;李荷莲;王博蔚;王强

来源:中华医学杂志 2009 年 89卷 39期

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作者:
韩丽英;叶明珠;李荷莲;王博蔚;王强
来源:
中华医学杂志 2009 年 89卷 39期
标签:
耐药性 转染 胎盘 干细胞 Drug resistance Transfection Placenta Stem cell
目的 将多药耐药基因(mdrl)通过逆转录病毒载体导人人胎盘源性间充质干细胞(PMSCs),评价耐药基因导人对P-MSCs干细胞特性的影响.方法 采用胰酶消化法自人足月胎盘组织中分离培养间充质干细胞(MSCs),将含有mdr1基因和绿色荧光蛋白(CFP)报告基因的重组逆转录病毒载体转染P-MSCs;应用流式细胞术检测转染后P-MSCs表型特征,四唑盐比色法和碘化丙啶标记测定其增殖活性和细胞周期,透射电镜下观察转染P-MSCs超微结构变化,条件培养液诱导法分析转染后P-MSCs向脂肪细胞、成骨细胞定向分化能力.结果 转染P-MSCs表达干细胞表面标志,如CD29,CD44和CD73,细胞倍增时间为23.9 h,生长周期仍符合干细胞增殖的特点,超微结构观察转染P-MSCs表面微绒毛增加,细胞内线粒体丰富,粗面内质网轻度扩张,且在特异诱导条件下具有向成脂、成骨定向分化潜能.结论 mdr1基因体外转染人P-MSCs对其干细胞特性无显著影响,这可为P-MSCs在大剂量肿瘤化疗中的应用提供实验参考.