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目的 构建RU486调控系统介导的重组腺病毒Ad-NRF2,并在H460细胞中进行表达,验证NRF2基因表达是否可调控及表达效率.方法 在腺病毒载体的基础上,引入携带RU486(米非司酮)诱导调控系统的Nrf2基因;用LUC基因及Dsred基因对RU486调控系统进行验证,并通过免疫印迹和RT-PCR技术检测Nrf2的表达情况.结果 LUC和Dsred的表达都随RU486呈剂量依赖性增加;Ad-RUNrf2腺病毒感染H460细胞后,通过RT-PCR及免疫印迹结果显示Nrf2的表达量随着RU486剂量的增加而增加,去除RU486后,Nrf2的表达也随之减弱.结论 携带RU486可调控式Nrf2基因腺病毒构建成功,并且在细胞内RU486能够调节Nrf2因子的表达.

作者:蔡旗旗;洪广亮;邱俏檬;李林芳;卢中秋;吴红平;王端明;梁欢

来源:中华医学杂志 2011 年 91卷 3期

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作者:
蔡旗旗;洪广亮;邱俏檬;李林芳;卢中秋;吴红平;王端明;梁欢
来源:
中华医学杂志 2011 年 91卷 3期
标签:
氧化性应激 腺病毒科 基因表达调控 Oxidative stress Adenovirdae Gene expression regulation
目的 构建RU486调控系统介导的重组腺病毒Ad-NRF2,并在H460细胞中进行表达,验证NRF2基因表达是否可调控及表达效率.方法 在腺病毒载体的基础上,引入携带RU486(米非司酮)诱导调控系统的Nrf2基因;用LUC基因及Dsred基因对RU486调控系统进行验证,并通过免疫印迹和RT-PCR技术检测Nrf2的表达情况.结果 LUC和Dsred的表达都随RU486呈剂量依赖性增加;Ad-RUNrf2腺病毒感染H460细胞后,通过RT-PCR及免疫印迹结果显示Nrf2的表达量随着RU486剂量的增加而增加,去除RU486后,Nrf2的表达也随之减弱.结论 携带RU486可调控式Nrf2基因腺病毒构建成功,并且在细胞内RU486能够调节Nrf2因子的表达.