目的 探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的气道黏蛋白(MUC)5AC的调节机制.方法 培养正常人气道上皮细胞HBE16,给予SphK1特异性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(DMS)处理及转染SphK1的小干扰RNA(siRNA)后,再各施以TNF-α刺激,四甲基偶氮唑盐法检测各组细胞增殖活力,Western blot法检测各组SphK1、环氧化酶2(COX-2)、磷酸化P38(p-P38)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和IκBα蛋白相对含量,酶联免疫分析法检测各组MUC5AC、前列腺素E2(PGE2)和环单磷酸腺苷(cAMP)的相对含量,荧光素酶报告基因系统测定cAMP反应结合蛋白(CREB)和核因子-κB(NF-κB)的相对活性,RT-PCR检测各组SphK1和MUC5ACmRNA的表达水平,免疫荧光法检测胞内MUC5AC含量.结果 与对照组相比,TNF-α组的SphK1mRNA和蛋白水平显著升高(均P＜0.01),COX-2、PGE2、cAMP、p-P38和p-ERK的含量明显增加(均P＜0.01),IκBα含量明显降低(P＜0.01),CREB和NF-κB的活性明显增强(均P＜0.01),MUC5AC mRNA和蛋白含量亦显著高于对照组(均P＜0.01);与TNF-α组相比,给予DMS处理后COX-2、PGE2、cAMP、p-P38和p-ERK的含量明显降低(均P＜0.01),IκBα含量显著增加(P＜0.01),CREB和NF-κB的活性明显减弱(均P＜0.01),MUC5AC mRNA和蛋白含最也显著降低(均P＜0.

作者：余红梅；李琪；尤列·皮尔曼；维克多·科罗索夫；周向东

来源：中华医学杂志 2011 年 91卷 6期